什么是蛋白質(zhì)毒素結(jié)晶試驗(yàn)：
在GB4789.14標(biāo)準(zhǔn)中,，在進(jìn)行蠟樣芽胞桿菌鑒定時蠟樣芽胞桿菌與蘇云金芽孢桿菌生化反應(yīng)相同,，但蘇云金芽孢桿菌在形成芽孢的同時,，會在芽孢旁形成一顆菱形、方形或不規(guī)則形的堿溶性蛋白質(zhì)晶體,，稱為伴孢晶體,，該晶體易被堿性染料著色，因此常用0.5%堿性復(fù)紅染料進(jìn)行染色觀察,。而蠟樣芽胞桿菌和其他芽孢桿菌不產(chǎn)生伴孢晶體,。這個染色實(shí)驗(yàn)就是蛋白質(zhì)毒素結(jié)晶試驗(yàn)。
操作步驟：
培養(yǎng)芽孢：將待測菌株接種至硫酸錳營養(yǎng)瓊脂平板，30±1℃培養(yǎng)24±2h,，并于室溫放置3-4天,。若芽孢產(chǎn)生不豐富，可在室溫繼續(xù)放置2-3天后觀察,。
原理：芽孢桿菌在營養(yǎng)條件缺乏時,，開始形成芽孢，因此在進(jìn)行細(xì)菌產(chǎn)芽孢相關(guān)試驗(yàn)時,，通常需進(jìn)行5-7天的放置或培養(yǎng),，待培養(yǎng)基內(nèi)營養(yǎng)耗盡，可獲得更豐富的芽孢,。
制片染色：挑取培養(yǎng)物少許于載玻片上,，滴加蒸餾水混勻并涂成薄膜。經(jīng)自然干燥,，微火固定后,，加甲醇作用 30 s 后傾去，再通過火焰干燥,，于載玻片上滴滿 0.5%堿性復(fù)紅,，放火焰上加熱（微見蒸氣，勿使染液沸騰)持續(xù) 1 min～2 min,，移去火焰,，再更換染色液再次加溫染色 30 s，傾去染液用潔凈自來水*清洗,、晾干后鏡檢,。觀察有無游離芽胞（淺紅色）和染成深紅色的菱形蛋白結(jié)晶體。
（注：在菌苔生長密集的地方營養(yǎng)消耗更快,，更容易產(chǎn)生芽孢,，因此挑取密集生長處的菌苔制片易觀察到更多芽孢）
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